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免疫組化服務的操作步驟介紹

發布日期: 2022-11-15
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   近年來,隨著免疫組織化學技術的發展和各種特異性抗體的出現,使許多疑難得到了明確診斷。在常規病理診斷中,5%-10%的病例單靠H.E.染色難以作出明確的形態學診斷。尤其是免疫組化在診斷和鑒別診斷中的實用價值受到了普遍的認可,其在低分化或未分化的鑒別診斷時,準確率可達50%-75%。
 
  免疫組化操作步驟
 
 ?、?、石蠟切片脫蠟至水。
 
 ?、?、3%H2O2室溫孵育5-10分鐘,以消除內源性過氧化物酶的活性。
 
 ?、?、蒸餾水沖洗,PBS浸泡5分鐘x2(如需抗原修復,可在此步后進行)。
 
 ?、?、5-10%正常山羊血清(PBS稀釋)封閉,室溫孵育10分鐘,傾去血清,勿洗。滴加一抗工作液,37℃孵育1-2小時或4℃過夜。
 
 ?、?、PBS沖洗,5分鐘x3次。
 
 ?、?、滴加適量生物素標記二抗工作液,37℃孵育10-30分鐘。
 
 ?、?、PBS沖洗,5分鐘x3次。
 
 ?、?、滴加適量的辣根酶或堿性磷酸酶標記的鏈霉卵白素工作液,37℃孵育10-30分鐘。
 
 ?、?、PBS沖洗,5分鐘x3次。
 
 ?、?、顯色劑顯色3-15分鐘(DAB或NBT/BCIP)
 
 ?、?、自來水充分沖洗,復染,脫水,透明,封片。
 
  從免疫組化結果而言,免疫組化技術服務主要涉及抗體免疫組化結果的描述與分析,圖片的確定與選取,相關數據的提供,上述工作是免疫組化工作的重點內容,只有嚴格的免疫組化設計,標準的免疫組化操作,專業化的結果分析才能更好的滿足客戶的要求,這點對于形式為腹水,上清,培養液之類的抗體顯得更為重要。
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